Ультрамикроскопия

Лазерный луч направлен под углом 90 градусов к оптической оси наблюдения, т.е. не попадает в объектив и на матрицу цифровой камеры (Рисунок А). Поле зрения при этом выглядит как темное поле. При наличии в образце наночастиц лазерное излучение будет рассеиваться на них во все стороны, в том числе и вдоль оптической оси объектива, попадая на матрицу цифровой камеры. В этом случае картинка станет темным полем с постоянно движущимися (в силу Броуновских сил) светящимися точками (Рисунок Б). Размеры этих светящихся точек не являются непосредственно размерами наночастиц: мы увидим рассеянный свет на наночастицах, а не сами частицы. Таким образом, здесь нет ограничения, связанного с дифракционным пределом. Определить размер частиц из одной такой картинки нет возможности, но можно подсчитать количество наночастиц в поле зрения. Зная объем, в котором происходит наблюдение, можно измерить концентрацию наночастиц. Для повышения достоверности измерения концентрации повторяются на сотнях кадров, полученных на исследуемом образце.

Специальное программное обеспечение (ПО) NPVision позволяет анализировать цифровые изображения, получаемые на приборе NPCounter, выделяя и подсчитывая в каждом кадре объекты интереса (ОИ) — светящиеся сферические объекты (наночастицы). Из анализа изображений ПО NPVision рассчитывает концентрацию частиц в исследуемом образце.